Vidéo: Comment examiner des coupes histologiques

Salut tout le monde ! C’est Nicholas de Kenhub et dans cette vidéo, je vais vous donner quelques trucs et astuces pour vous aider à examiner correctement des coupes histologiques.

Faisant partie de vos cours d’anatomie, vous allez devoir suivre des cours d’histologies destinés à vous familiariser avec les structures que vous étudiez au niveau microscopique ou cellulaire. Souvent, lors de préparations microscopiques ou de lames histologiques, les étudiants font des erreurs en identifiant les structures ou en s'orientant sur la lame. Cela peut s’avérer très troublant et décourageant. C’est tout à fait compréhensible étant donné que la plupart des étudiants sont habitués à observer des structures macroscopiques telles que les artères de la tête et du cou que nous voyons ici, mais ne sont pas habitués à regarder des coupes microscopiques. 

Cette coupe montrant du sang ne ressemble en rien à l’anatomie macroscopique. Cela peut donc être déroutant. Il existe également de nombreuses techniques de coloration différentes utilisées sur les préparations qui modifient le contraste de la lame et s’ajoutent à la confusion des étudiants. Mais la bonne nouvelle est que chez Kenhub, nous avons mis en commun quelques astuces pour vous aider à examiner des coupes d’histologie avec plus d’efficacité. 

Alors, commençons par la première étape.

Avant de poser votre lame sous le microscope, essayez de déterminer à l'œil nu la forme de votre préparation. Cela peut sembler un peu trivial, mais observer la lame avant de la placer sous le microscope vous aidera à vous orienter lorsque vous regarderez éventuellement la coupe à travers la lentille. Par exemple, sur cette coupe transversale, on peut voir une préparation annulaire ou en forme d'anneau. Si vous l’avez remarqué avant d’utiliser le microscope, vous êtes sur le point de reconnaître les structures de la préparation.

Ensuite, placez votre lame sous l’objectif du microscope et calibrez-le afin d’obtenir une image bien nette. Commencez par le grossissement le plus faible et déplacez la lame pour voir toute la surface, car celle-ci est toujours plus grande que l'objectif. Une fois que vous avez jeté un coup d'œil à l’ensemble de la coupe au plus faible grossissement, continuez à examiner votre lame en passant aux grossissements plus importants en vous assurant d’obtenir une image nette à chaque fois. Vous pouvez effectuer cela plusieurs fois afin de passer à des grossissements de plus en plus importants comme nous le faisons ici. 

Il est essentiel d’avoir une image claire à chaque grossissement afin de contrôler quelle partie de la coupe vous regardez, surtout si vous souhaitez zoomer sur une zone spécifique. Il est aussi important d’observer votre coupe sous différents grossissements, car il peut y avoir des structures ou des cellules plus ou moins grandes qui peuvent ne pas être visibles avec un seul grossissement. C'est le maximum que nous allons zoomer dans cet exemple.

Une fois que vous avez réussi à observer votre coupe et ses structures à différents grossissements, la prochaine étape consistera à rédiger une description des structures majeures et mineures que vous pouvez voir. Rédigez le nom des structures que vous connaissez et aussi la description de celles que vous ne connaissez pas ou dont vous n’êtes pas sûrs afin que vous puissiez ensuite demander à un professeur de vous aider ou bien les rechercher plus tard.

Faisons cela pour cette coupe. Nous pouvons voir des vaisseaux sanguins ici, des cellules épithéliales qui semblent être des cellules cylindriques pseudostratifiées, des cellules plus claires dans cette couche, du tissu conjonctif dans cette zone contenant des fibres de collagène colorées en bleu, un espace vide où il n'y a pas de tissu et du cartilage hyalin si nous déplaçons la lame.

Après avoir pris des notes sur les structures que vous pouvez voir et/ou identifier sur la coupe, la prochaine chose à faire est de déterminer le type de coloration, la coupe et le processus de préparation employés pour préparer votre lame. 

Ici, nous naviguons à travers quelques exemples de colorations diverses incluant l’hématoxyline et l’éosine, la réaction à l’acide périodique de Schiff, l’imprégnation argentique, le bleu de toluidine, le tétroxyde d’osmium et le trichrome de Masson. Comme vous pouvez le voir, la technique de coloration au trichrome de Masson paraît très similaire à la coloration de la coupe que nous examinons. Notre coupe comporte également une coloration au trichrome tout comme le trichrome de Ladewig, couramment utilisé pour visualiser les muscles et le collagène et différencier le tissu conjonctif des autres structures cellulaires.

Parfait ! Maintenant que nous avons regardé notre coupe sous le microscope et que nous avons identifié les structures et les techniques de coloration utilisées, il est temps de relier ces informations et d’identifier la préparation. Si nous rassemblions toutes les structures que nous avons observées, quelle partie du corps correspondrait le plus à notre coupe ? Grâce à la coloration au trichrome, il est facile d’identifier le tissu conjonctif, les vaisseaux sanguins, les cellules épithéliales et le cartilage hyalin, que nous avons localisé ici.

Le cartilage hyalin se trouve dans un nombre limité d’endroits du corps, notamment sous la peau des oreilles, dans le nez attaché à la cloison nasale, dans la trachée et les petits tubes respiratoires sous forme de structures annulaires, dans la structure irrégulière du larynx  et les surfaces articulaires lisses des os des articulations synoviales. En nous rappelant la forme générale de la préparation sur notre coupe, nous pouvons voir la forme globale d’un anneau.

Des idées jusqu’ici ? La forme de la préparation nous donne des indices et permet d’éliminer comme possibilité que la coupe soit un simple échantillon de cartilage du nez ou des oreilles ou la surface articulaire d’un os. Ce n’est probablement pas le larynx non plus puisque sa forme est si irrégulière. La trachée et les plus petits tubes respiratoires ont une forme d'anneau distincte ainsi qu'un cartilage hyalin. Il y a aussi des vaisseaux sanguins qui traversent la lame que nous voyons ici et nous pouvons voir le bord inégal des cellules épithéliales contre une ouverture ou une lumière ainsi que les épaisses couches de tissu conjonctif en profondeur.

Nous avons également observé des cellules plus claires au sein de l'épithélium cylindrique pseudostratifié. Ce sont les cellules caliciformes qui sécrètent le mucus et la zone en violet clair dans la partie inférieure de la coupe juste ici est probablement une muqueuse. Cela devrait être un gros indice. Avez-vous découvert ce que c’était ? La trachée !

La trachée est de forme annulaire, possède du cartilage hyalin ainsi que de nombreux vaisseaux sanguins et une épaisse couche de cellules épithéliales et de muqueuse. Les tubes respiratoires plus petits comme ceux qui commencent à se ramifier ici sont beaucoup plus minces et auraient un aspect différent sur une lame et les cellules épithéliales cylindriques pseudostratifiées se transforment en cellules cubiques à mesure que les tubules deviennent plus petits.

Félicitations ! Vous avez identifié une coupe. Vous n’en avez pas terminé pour autant. C’est une bonne idée d’ajouter des informations supplémentaires à vos notes afin d’identifier une préparation. Cela peut être les fonctions cellulaires, les fonctions cellulaires anatomiques et d'autres informations provenant de vos cours et de vos professeurs. Ici, nous notons les fonctions de la trachée, les anneaux cartilagineux et les cellules épithéliales sécrétant du mucus. Cela vous aide à véritablement comprendre pourquoi l’histologie d’une section ressemble à ce qu’elle est.

Rappelez-vous que la forme suit la fonction, même à un niveau microscopique.

Voilà ! Vous en avez terminé avec votre étude d’une coupe histologique. Nous espérons que vous aurez beaucoup plus de facilité à examiner les lames d'histologie, mais rappelez-vous de ne pas sauter sur des conclusions trop hâtives même si vous pensez que vous savez déjà quelle préparation vous êtes en train d’observer. 
Gardez l’esprit ouvert et examinez tout le contenu à votre disposition avant d’identifier définitivement votre coupe.

C’est la fin de ce tutoriel. Merci d’avoir regardé et travaillez bien !